Pour différencier les bactéries Gram-positives des bactéries Gram-négatives, la coloration de Gram-Hücker repose sur le même principe que la coloration de Gram-Nicolle. La structure des parois bactériennes et leur perméabilité à l’alcool permettent de différencier les bactéries Gram-négatives des bactéries Gram-positives. Dans cette technique, le violet de gentiane est remplacé par le cristal violet oxalate (qui ne nécessite pas de filtration) et la fuchsine de Ziehl par la safranine.
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